分子診断：リアルタイムPCR

現在、分子診断機構は、多数の開発のための原動力であったポリメラーゼ連鎖反応（PCR）、設計された 診断の方法 遺伝物質の決意に基づいて、疾患のを。 遺伝子断片（特に使用してリアルタイムPCRを実施するための 核酸） 、他の個人には見られない原因物質のを。

PCRの原理は、所定のプログラムのための温度領域の周期的な反復を提供し、サーマルサイクラーと呼ばれる特別な単位でのDNAポリメラーゼによる時間の特定の病原体DNA断片の数百万の乗算です。

診断PCRは、酵素活性を維持し、増幅の一連を繰り返すことを可能にします。 百十 - 増幅は、30サイクル後に、1サイクルで、円滑に病原体倍のDNAの特定の断片のコピー数を生じたとき。 すなわち、PCRは十分に小さい病原体を決定するために診断に使用される理由の同定は、それなしには不可能です。

RNAは、リアルタイムでPCRのテンプレートではないことに留意すべきです。 したがって、DNAを得るために、増幅の前に、ウイルスRNAを検出するために、それの対応する断片と相関しました。 ポリメラーゼ連鎖反応は、DNAおよびRNA測定の病原体を製造することを可能にします。 このようにして得られた情報を用いる治療の有効性、および臨床予後の評価を監視するために使用されます。

また、リアルタイムPCRは、正しい診断に対する障壁として役立つ標的DNAまたはアンプリコンを、復号化及び誤った結果をもたらすことに関して追加のアクションを必要としません。 このアプローチは、ポリメラーゼ連鎖反応のリスク低減製品につながる電気泳動ステップを、使用しないことが可能となります。 また、薬剤と操作の数が減少するため、調査の時間を短縮し、それは、プロセスを簡素化し、エラーの可能性を減少させます。 PCRはまた、あなたが増悪期間を特定し、患者を治すためのタイムリーな措置をとることを助けるために臨床試験における病原体のDNAのコピー数の初期値を指定することができます。

今日では、リアルタイムでの固定の増幅法が多数存在しています。 最も一般的に蛍光プローブ、アンプリコンの蓄積に応じて、光モジュールとサーモサイクラーと呼ばれる特殊な装置を用いてリアルタイムで記録変化するの放射強度と相関したアンプリコンを適用する様々な技術を用います。 これは、分析の感度の高いレベルを提供します。 同一のPCR産物で、それはいくつかのケースで電気泳動を使用しては気づいていない時には、副生成物の大量とともに、検出することができます。

PCRによってリアルタイムで陽性と陰性対照サンプルを使用。 したがって、試験で陽性と陰性の試料は別々の試料、そのような各試料に導入し、全ての分析工程を通過する前記対照試料として分析しました。

今日では、実行するための多数のデバイスが存在する ポリメラーゼ連鎖反応。 これらは、Bio-Rad社、アプライドバイオシステムズ、セファイドとロシュが含まれます。 それらのそれぞれの利点と欠点を持っています

それは結果の即時の解釈を実行する機会を与えるので、世界中の大規模科学、研究および診断センターで使用診断方法 - それはPCRことに留意すべきです。