水、土壌、大気の研究のための微生物学的方法

微生物 - 自然界に広く分布している小さな、主に単細胞生物、。 彼らは植物で、ヒトおよび動物におけるすべてのメディア（空気、土壌、水）に記載されています。

質的多様性と生物の数は、栄養化合物に主に依存しています。 しかし、それはまた、湿度、温度、通気、日光やその他の要因の作用として重要です。

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. 衛生微生物学研究の自然なメディアのための方法は、病原体の存在を検出することができるし、削除または感染症を防止するための措置を開発するために、得られた結果に基づいてその量を決定します。 また、定量アカウントが生態系モデリングとガバナンスの自然なプロセスの開発のために必要とされています。 . 私たちは、 微生物学的検査の方法が何であるかをさらに検討してみましょう。

土壌

これは、感染性の病状の伝送の可能な経路の一つとして学者によってみなされています。 土壌中の分泌ヒトまたは動物の患者が病原体を貫通して。 それらのいくつかは、具体的には、胞子は、（時には数十年のために）長い時間のために土壌中に残留することができます。 позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). 土壌秋の病原体などなど、破傷風、炭疽菌、ボツリヌス中毒、およびなどの危険な感染症。 土壌の衛生微生物学研究の方法は、あなたが「微生物数」（グラムの土壌中の微生物の数）、および大腸菌インデックス（大腸菌の数）を定義することができます。

土壌分析：概要

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. 土壌の微生物学的検査のための方法は 、主に固体に直接顕微鏡や文化を帰するべきで 栄養培地。 微生物や土壌に生息する彼らのグループの集団は、分類学上の地位や生態系機能に異なります。 科学では、それらは一般的な用語の下に団結している「土壌生物相。」 プライマー - 微生物の生息地膨大な数。 土壌のグラムで1からその細胞の100億に存在しています。 この環境では、積極的に様々な腐生微生物の参加を得て、有機物の分解をとります。

微生物学的方法の顕微鏡的研究：手順

メディアの分析は、サンプリングで始まります。 この目的のために、先に剥離しおろしアルコールナイフ（ショベルを使用することができます）。 その後、サンプル調製。 次のステップ - 細胞染色塗抹標本を数えます。 個別に各ステップを考えてみましょう。

サンプリング

農業用土壌の分析に層全体の深さから採取したサンプルを傾向があります。 それは外来微生物叢中に存在することができるように、まず、地上2〜3センチメートルを除去します。 その後、地面の面積でモノリスを取る勉強。 それらのそれぞれの長さは、サンプルにしたいから、層の厚さを遵守しなければなりません。

100-200平方のプロットに。 7-10は、選択されたサンプルをMです。 それぞれの重量 - 0.5キロのための。 サンプルは、バッグの中に完全に混合されなければなりません。 その後、約1キロの体重の平均サンプルを取ります。 これは、布の袋に封入され羊皮紙（無菌）パッケージ内に配置されるべきです。 冷蔵庫に保存した試料の直接分析の前に。

調査の準備

攪拌した土壌は、乾燥ガラス上に注ぎました。 そのアルコールで事前にワイプやバーナーの上に燃えます。 ヘラ土壌を十分に混合し、均等に拡大しました。 根や他の外国の要素を削除するために必須です。 これを行うには、ピンセットを使用しています。 バーナー上記操作ピンセット、スパチュラ前に点火し、冷却させます。

ガラス上に分散様々な土壌プロットの、小さな部分を選択しました。 彼らは技術的な規模での磁器の皿に秤量しました。 является специальная обработка образца. 微生物学の研究の必須ステップ微視的な方法は、サンプルの特別な処理です。 2は、予め滅菌フラスコ中に調製しなければなりません。 その大きさは250ミリリットルを超えないようにしてください。 フラスコの一つは、水道水100mlに注ぎました。 それは土壌の0.4〜0.8ミリリットルの液体サンプルを取り、ペーストに湿らせたので。 混合物を5分間指やゴム乳棒で擦られるべきです。

第一のフラスコからの水が土壌塊空のフラスコに移しました。 さらに、彼女の背中をこすり。 この質量後バーナー火炎近くフラスコに移します。 土壌懸濁液を含む容器を5分間シェーカー上で振とうしました。 その後、それが約30秒間静置しました。 これは、大きな粒子が沈降することを可能にするために必要です。 半分分の質量は、製剤の製造に使用された後。

固定塗抹標本上の細胞数

, разработанному Виноградским. 土壌の直接顕微鏡研究はVinogradskiiを開発した微生物学研究の方法により行われます。 懸濁液の一定体積中の微生物の細胞の数を数えました。 固定塗抹標本を研究することは、長期的に薬を保管し、いつでも計算を実行することができます。

薬剤の調製以下のように。 スラリーの一定量（典型的には0.02〜0.05ミリリットル）をスライド上にマイクロピペットを用いて適用されます。 この溶液に寒天（混合アガロペクチン多糖類、アガロース褐色および赤色藻類黒海から抽出された）の滴を添加し、急速に撹拌し、SQ領域4-6に広がります。 センチ。パップ空気乾燥し、20〜30分間固定しました。 アルコール（96％）。 次に、薬剤を蒸留水で湿らせ、P-P石炭酸エリスロシン20~30分に入れました。

染色した後、それを洗浄し、空気中で乾燥させました。 イマージョンレンズから行っ細胞数。

固体培地に播種

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. 微生物学的検査用顕微鏡法は、多数の微生物を検出することができます。 しかし、にも関わらず 、この、の方法 接種は、実際には、最も一般的です。 その本質は、固体培地上でペトリ皿中の薬物（土壌懸濁液）の量を播種することからなります。

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. 微生物学的研究のこの方法は 、アカウントに数量だけでなく、グループ、およびいくつかのケースで、かつ微視的な植物の種組成だけでなくかかります。 通常、透過光でペトリ皿の底部から、生じたコロニーの数を計数します。 計算領域上にマーカーまたはインクドットを配置しました。

水の分析

水体の微生物叢は、原則として、その周りの土壌の微生物の組成を反映しています。 имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. この文脈において、 水及び土壌の衛生微生物学的分析の方法は、特定の生態系の状態の研究において特に実用的に重要です。 新鮮な水は、ルール、球菌、桿菌として、含まれています。

水中での嫌気性菌は少量で見つかりました。 原則として、彼らは、精製の過程に参加し、泥の中、水の遺体の下部に掛けます。 叢の海と海は、有利に塩生（好塩）細菌を表しました。

水では、掘り抜き井戸には微生物が事実上ありません。 これは、土壌層の濾過能力によるものです。

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. 微生物学水研究の従来の方法は、微生物や大腸菌力価の場合、またはインデックスの定義を検討しました。 第一の指標を1mlの液体中の細菌の数を定義します。 彼らはまだ検出可能な最小数または最大希釈液 - 大腸菌指数は、水のリットル中に存在する大腸菌の数、及び場合力価を表します。

微生物数の決意

次のように水のこの方法は衛生微生物学的検査があります。 水1ml中の（中間）中温性および通性嫌気性菌の数が決定される37℃で肉ペプトン寒天（一次媒体）にすることができる好気性菌。 日中の2-5 Pの倍率で見えるコロニーを形成しました。 または裸眼。

является посев. 水の微生物学的分析の方法の重要なステップが播種されます。 各サンプルは、少なくとも2つの異なる体積を播種されているからです。 各カップ内の水道水の分析は、純粋な液体の1〜0.1ミリリットルで作られており、0.01〜0.001ミリリットルを汚染されている場合。 0.1ミリリットルまたは流体の少量の接種用蒸留（無菌）水で希釈します。 一貫して10倍希釈を準備します。 それらの各1mlを2枚のペトリ皿で行われます。

栄養寒天で満たさ繁殖。 それは最初に溶融し、45度に冷却する必要があります。 撹拌した後、活性媒質が固化するための水平な表面上に残されます。 37度で。 作物は一日を通して成長しています。 позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. 微生物水研究の考え方法は 300に考慮30の範囲のコロニーの数、それらの料理の結果を取ります。

空気

これは、微生物の中継地と考えられています。 являются седиментация (оседание) и аспирация. 微生物学の研究の主な方法は、空気沈降 （セトリング）と吸引されています。

叢の空気環境を任意に変数や定数に分かれています。 最初のグループは、酵母、発色球菌、芽胞ベアリングバチルス・コリ、乾燥、光への曝露に耐性である他の微生物を含んでいます。 代表変数叢、長い彼らの活力を維持し、彼らの通常の生息地から空気中に浸透します。

大都市の大気中で農村地域の大気環境におけるよりもはるかに多くの微生物。 海の上に、森林は非常に少数の細菌です。 雪と雨：空気浄化は、沈殿を促進します。 屋内微生物オープンスペースにおけるよりもはるかに。 その数は、定期的な換気が存在しない状態で冬に増加しています。

沈降

считается простейшим. 微生物学微生物学的研究のこの方法は最も簡単であると考えられています。 これは、重力下で開放ペトリ皿中の寒天表面上の液滴と粒子の沈降に基づいています。 沈降法は、正確に空気中の細菌数を決定しなくてもよいです。 実際には、オープンカップにダスト粒子や細菌かなり難しいの液滴の微細画分をキャッチすることです。 表面上に主に大きな粒子を保持します。

この方法は、空気の分析に使用されていません。 この環境は、空気流の速度の大きな変動によって特徴付けられます。 沈降は、しかし、より洗練されたデバイスまたは電源の非存在下で使用することができます。

Omelyansky法で行う微生物の数を決定します。 これに応じて、100平方寒天の表面領域上に5分間。 CMは、細菌の数は、空気10リットルで存在する落ち着きます。

「捜査の微生物学的方法の統一について」535を注文します

細菌学的分析は、様々な感染症の診断、予防および治療を目的とした複雑な臨床および研究室の活動で重要な位置を占めています。 しかし、環境の研究は、それらが限定されるものではありません。

特に重要なのは、病院での生物学的材料の細菌学的分析です。 医療施設で行われた研究では、要件を増加させました。 「捜査の微生物学的方法の統一について」の注文の目的は、微生物学的診断の質と効率の向上、細菌学的分析を改善することです。

女性では塗抹標本の顕微鏡検査

これは感染症、性感染症、および日和見感染症（日和見細菌）の診断のための分析の重要な方法です。

微生物叢の定性的および定量的組成を評価するための顕微鏡分析、サンプリングの正しさを確認してください。 例えば、子宮頚管から採取したスワブで膣上皮の存在が生物学的サンプルの選択のルールの違反を示しています。

この場合、微生物学的検査は、一般的にいくつかの問題が続いていると言われています。 これらは、下の生殖管に通常異なる年齢で変化する多様な微生物叢を提示しているという事実に関連しています。 研究の効率を改善するために、標準化ルールを開発しました。

ウイルス感染症の診断

これは、RNAおよびDNA病原体を検出する方法によって行われます。 彼らは主に病理学的材料中のヌクレオチド配列の決意に基づいています。 この目的のために、分子プローブ。 彼らは、人工放射性標識またはビオチンで標識されたウイルス核酸（に相補的）に相補的な核酸を作製しています。

方法の特異性は、対ヌクレオチド（又は数十の）数百を含む特定のDNA断片のコピーが繰り返されます。 複製（コピー）が拡張のみ特定の単位で開始してもよいということです。 プライマー（プライマー）は、それらを作成するために使用されます。 彼らは、合成されたオリゴヌクレオチドです。

PCR診断（ポリメラーゼ連鎖反応）は、実行が簡単です。 この方法は、あなたが迅速病理学的材料の少量を使用して結果を取得することができます。 PCR診断を使用して、急性、慢性及び潜在（隠された）感染症を識別する。

この方法の感度がより好ましいと考えられる場合。 しかし、現在のテストシステムは、十分に信頼性がないので、PCR診断は完全に伝統的な方法を置き換えることはできません。